产品差异化调研报告(精选5篇)

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所属分类:文学
摘要

对媒体的关注与接触因人而异 尽管大众媒体依然垄断着大部分的广告市场,但随着人们生活空间的扩展以及生活方式的不断发展,网络、地铁、轻轨、超市、药店、医院、商场、机场内,灯箱、广告牌、LED……媒介已经触及到人们生活的各个角落。调查结果显示,无论…

产品差异化调研报告(精选5篇)

产品差异化调研报告范文第1篇

2003年,中国广告业迎来千亿盛宴,营业额达到1078.68亿元。面对规模已达千亿元的广告“大餐”,中国的消费者究竟感受如何?面对着渗透在周遭的各类广告媒体,他们真正相信其中所传达的各种信息吗?对于广告的关注和信任程度在他们最终的购买决策中能够形成的影响力究竟又有多大呢?

日前《现代广告》杂志社与零点研究集团共同对北京、上海、广州、武汉、成都、沈阳、西安、济南、大连和厦门十个城市中3212名18~60岁居民就广告接受度的问题进行了入户访问。调查以多阶段随机抽样方式获取合格受访样本,数据结果已根据各地实际人口规模进行加权处理,在95%的置信度下本次调查的抽样误差为±1.12%。

对媒体的关注与接触因人而异

尽管大众媒体依然垄断着大部分的广告市场,但随着人们生活空间的扩展以及生活方式的不断发展,网络、地铁、轻轨、超市、药店、医院、商场、机场内,灯箱、广告牌、LED……媒介已经触及到人们生活的各个角落。调查结果显示,无论是被动接触还是主动关注,消费者在日常生活中接触最多的媒体广告是电视广告(96.4%和68.2%)、报纸广告(79.1%和51.7%)和杂志广告(24.5%和16.9%)。值得注意的是,网络广告(20.6%和11.1%)和路牌广告(14.6%和9.8%)的被动和主动接触率虽然和电视、报纸广告还有相当差距,但是与杂志广告已经非常接近,并且已经超出了传统四大媒介之一的广播广告(13.9%和6.0%)。

需要注意的是,城市居民对广告的主动接触意愿存在明显的地域差异。总体上看,成都(250.3%)、沈阳(198.8%)和上海(196.8%)等地区对媒体广告的主动关注度较高,均明显高于总体平均水平(187.6%);西安(182%)、厦门(178%)、济南(176.7%)和广州(175.8%)等地区对媒体广告的主动关注度与平均水平较为接近;而武汉(169.3%)、大连(161.8%)和北京(156.3%)的主动关注程度则相对处于较低水平。如果进一步比较各地区对不同类型媒体广告的关注差异,则可以发现成都和沈阳的居民对传统媒体(电视、报纸和杂志)广告及新兴分众媒体(网络和路牌)的兴趣度较高,而厦门、北京、广州和武汉的市民则对网络广告更为关注。

性别、学历、年龄和收入不同的人群在主动接触各类广告的程度上的差异主要表现为:女性(71.7%)对电视广告的关注程度要高于男性(63.6%),而对于网络广告的关注要明显低于男性(女性为8.1%,男性为15.2%),仅为男性的二分之一。学历较高(大专以上文化程度)的群体比学历较低(高中以下文化程度)的群体更关注网络和杂志广告。

从年龄特征上看,31~50岁的居民对报纸广告的关注程度较高,18~30周岁的居民对网络广告关注程度较高,23~40岁的居民对路牌广告的关注明显高于其它群体,而广播广告则吸引了更多的40岁以上的消费者。

收入差异与广告关注度的相关性表现在,个人月均收入在1000元以下的群体对电视广告的关注度最高,1001元~2000元之间的群体对报纸和杂志广告的关注度要明显高于其他群体,3001元~4000元之间的群体对传统媒体广告(电视、报纸和杂志)的关注度要明显低于低收入阶层,但是对网络广告的关注程度却在不同收入阶层中占首位,达到23.1%;而收入水平较高的4000元以上的群体中不主动关注广告的群体是最高的,占21.8%,是对广告涉入程度最低的群体。

当问及消费者主动阅读或者关注广告的主要动因时,大多数消费者都选择了“及时了解新产品的信息”(56.2%)和“在买东西前了解相关产品信息”(51.5%),可见广告本身的价值仍在于传递产品或品牌信息,而广告本身的美学价值――“广告画面具有艺术感,好看”(13.9%),“广告语都很经典,有趣”(10.3%)只列于第四位和第五位。

研究人员提醒,作为广告的载体,目前中国市场上的大众媒体依然拥有强势地位,新兴分众媒体则发展势头强劲。电视和报纸广告这两种大众媒体仍在消费者中吸引着更多“眼球”的注意力,这在一定程度上与目前广告行业在这两大媒体上的投放量是一致的,2003年的广告营业额中电视和报纸广告就占据了将近一半的比重。而杂志和广播是分众化发展最为明显的媒体,各大广播媒体交通频道、音乐频道及面对受众特征越来越细分的各色杂志即是最好明证。同时,新兴媒体的发展潜力不可小视,其中尤以网络广告为典型代表。传统的媒体都是在以“说服”的方式向消费者单向传达信息,而网络使消费者与广告直接的双向沟通成为可能。以路牌为代表的户外广告一旦形成网络,就将覆盖广泛的区域。

从关注不同类型广告媒体的群体特征上可以看到,那些较为高端的消费者,即受教育程度更高、收入更高的群体在电视、报纸这样的大众媒体上的关注程度要明显低于那些低收入群体,而对于网络这样的新兴媒体却更为注意。换言之,广告主在大众媒体上花费的大量的资源实质上并不一定能最有效地接触到那些对消费潮流和消费时尚具有领导力的群体。因此,基于对不同目标受众的差异化传播策略,应首先界定清楚自己希望接触的目标群体,然后再决定采取什么样的媒体组合、覆盖方式和投放量。对于同一目标受众,更为明智的方式则是整合媒体资源,力求“准”与“多”的结合。比如,分众媒体和传统媒体的初步融合已经初露端倪,电梯与电视组合成电视媒体,公交车与电视组合成公交移动电视,地铁与电视形成地铁液晶显示广告。

广而告之未必能告而信之

任何广告的目的都在于影响消费者的购买决策。而在“传播-影响-购买”的过程中,消费者对广告的信任程度是广告效度能否实现的基本平台。但是目前广告的公信力状况在总体上并不乐观。调查表明,不相信广告内容的消费者(56.1%)要比相信广告内容的消费者(38.9%)高出17.2%。

从不同地区存在的差异来看,上海、广州、成都和沈阳的消费者对广告的信任度要高于平均水平。对广告信任程度不同的人群具有不同的核心特征:相信广告的群体为31~50岁、家庭月均收入1501~3000元、高中文化学历的女性人群;不太相信的群体为18~30岁、3001~5000元或无固定月均收入、大专文化学历的男性;一点儿都不相信的是51~60岁、初中及以下文化、月收入1500元以下的群体。

进一步研究不同类别产品在不同媒体广告上的信任度可以发现,各类产品在电视和报纸上的广告的受信任程度均相对较高,广播广告则最低;尽管网络广告在总体上的受信任程度要稍高于路牌,但从此次调查中所测的产品来看,部分产品(房地产、手机、汽车和家电等)在受众中的信任程度要低于路牌广告,可见虽然网络的发展速度较快,但是目前在受众中获得的可信度仍处于较低水平。对于同一类产品,电视和报纸广告的受信任程度较为接近,尤以汽车(24.1%和24.2%)、手机(29.4%和28%)、数码产品(19.9%和17.7%)和电脑(16.7%和15.6%)等商品为代表;杂志、广播、路牌和网络上投放广告获得的信任度差异较大。比较各类产品广告的受关注程度和受信任程度,已处于完全竞争市场的成熟行业的产品信息(家电、电脑、手机)获得的信任度较高,而高度垄断行业的产品和服务(金融、通信和教育)的可信度较低。

从消费者对广告是否可信的评价依据来看,广告主本身的信誉仍是最关键的决定因素。“做广告的企业的信誉”(53%)在各种原因中高居首位,其次则是“登载广告的媒体的可信度”(21.5%),“广告本身的创意水平”(17%)在一定程度上也会影响到消费者的信任评价。

广告的影响力由产品和媒体决定

调查表明,消费者在主动获取具体产品和服务的信息时,最依赖的是电视广告(79%)和报纸广告(64.1%),其次为杂志广告(18.5%)和网络广告(14.5%),路牌和广播广告被关注的程度最低。而各类广告对消费者的影响力差异较大,依次为电视广告(78%)、报纸广告(49.3%)、杂志广告(15%)、网络广告(9%)、路牌广告(8.5%)和广播广告(7.8%)。

性别、学历、年龄和收入不同的人群在购买决策中受到各类广告影响力的差异表现为:电视广告对女性(80.2%)的影响力要明显高于男性(75.2%);网络和杂志广告对于学历较高(大专以上文化程度)的群体更大,而学历较低(高中以下文化程度)的群体则更容易受到电视和报纸这样的大众媒体广告及路牌广告的影响。

从年龄特征上看,电视广告对18~40岁的消费者影响力最大,报纸广告对31~50岁的消费者影响力较大,杂志广告对18~22岁和31~50岁的消费者影响力较大,网络对18~30岁的消费者影响力较大,路牌广告对23~40岁的影响力明显高于其他群体,而广播广告影响了更多的41~60岁的消费者。

收入差异与广告影响力的相关性表现在,电视、报纸和路牌广告对个人月均收入在2000元以下的群体影响力较大,杂志对月均收入在1001元~3000元群体的影响力较大,而网络广告对于月均收入1001元以上的群体均有影响,1000元以下的低收入群体受到广播广告的影响要高于其他收入阶层。

总体而言,不同城市消费者在广告接受度上呈现以下特征:成都和沈阳的消费者属于媒体广告的高接受度群体,他们对电视、报纸、杂志和路牌广告的关注程度、信任程度都较高,在购买决策中受到的影响力也较大,表明他们被媒体广告影响的渠道较为多样;西安(报纸广告)和上海(杂志广告)消费者对媒体广告的接受范围较窄,仅对一种媒体表现出较高的接受度;济南消费者则选择了报纸和广播广告;大连(广播)、厦门(路牌)和武汉(网络广告)市民在形成了对一种特定媒体广告较高的接受度的同时,也分别在网络和广播广告上有较高的信任度和受影响力;而北京消费者虽然对电视广告的关注程度并不高,但信任程度和受影响力程度处于较高水平。

产品差异化调研报告范文第2篇

IT互联网行业与传统行业有很大的区别,商业和运营管理模式需要不断的探索和创新,这就要求行业人力资源管理的理念和实际操作经验也不断的改进和发展。在IT互联网行业中,由于从业人员年龄较低、学历较高使得这个层级的人群是离职率较高的群体,而且他们对企业文化、工作环境、沟通交流和薪酬待遇的要求也很高,这就给IT互联网行业人力资源管理者的管理工作带来了很大的挑战。尤其是企业激励机制建设环节,更应该体现企业优势,施行差异化管理。在当前行业薪酬水平不断攀升的情形下,人力资源管理者应该掌握行业人力资源管理实践趋势,尤其是薪酬管理的趋势。那么目前IT互联网行业的薪酬现状如何呢,我们将通过薪酬调查报告详细解析。

 

获风投企业薪酬竞争优势明显

据人力资源解决方案服务公司Kelly Services中国西北地区运营总监宋一杰先生介绍,当企业拿到一份薪酬调查报告时,应当了解这份报告来源的背景及调查的企业群作为参考,不能盲目的去使用各种报告。互联网行业薪酬水平处于全行业中的高位,每年薪酬增长幅度也高于软件开发、硬件制造等关联行业。在互联网行业中,核心部门的员工对企业的发展方向和发展速度起着决定性的影响,他们承担着更大的责任和压力,因此其薪酬也会相应地高一些。而网站内容等互联网传统部门已不是互联网公司赢利重点,所以其薪酬增长相对较慢,导致了其部门员工薪酬处于同层级员工较低水平。但是随着风险投资机构的介入,对互联网企业人力资源战略和薪酬策略的影响很大,不仅体现在长期激励层面,也体现在年度总现金收入层面。互联网公司得到风险投资前后,薪酬水平差异明显。另据Kelly Services IT行业中国区负责人刘威女士介绍,由于互联网公司与国内外风险投资者有着密切的联系,能制定公司财务战略和洽谈融资事务的财务总监在人才市场一直是稀缺人才,所以企业纷纷加大了财务部门的人力成本,除了财务总监之外,业务总监、业务拓展总监和人力资源总监这几个职位被称为IT互联网企业最有潜力的职位。人力资源总监在企业战略中处于重要地位,随着互联网公司多元化的发展,其会要求员工具备更高的能力,所以公司对人才的招聘、培训、绩效考核等制度也会有更高的要求,同时,出于促进公司发展和有效控制人力资源成本的目的,公司对人力资源战略和薪酬体系的制定也会更加严格,这就要求负责统筹管理这方面工作的人力资源总监具备更高的能力,反映在薪酬上就是公司愿意为有能力的人力资源总监提供更诱人的薪酬。

 

薪酬报告能帮助企业调整薪酬政策

在高速增长的互联网行业,其薪酬体系则表现出了混乱的状态。在竞争激烈的市场背景下,薪酬政策的制定不能光看自己的企业内部情况,而是要看本企业在整个行业的定位停留在哪一个水平上。宋一杰先生称,企业在参考薪酬报告的时候,要考虑到拿这份报告做什么,是用来解决人员的稳定性还是作为第二年公司薪酬结构系统改善的参考,或者是用来吸引人才,只有有目的的合理看待薪酬调查报告才能真正让薪酬报告起到作用。刘威女士则表示,如果一家企业定位在这个行业的前几位,那工资水平也要相应的在同一水平上,否则人才就会流失。因此,薪酬调查报告对企业而言,可以通过这个报告所显示的工资增长率来调整自己公司来年的工资预算政策。要通过薪酬调查报告了解市场情况,进行内外部比较,其中要把岗位职责、需求等因素考虑进去。例如一个研发部门的领导职位,有的是表现在管理方面,有的是表现在技术方面,这样的需求就会导致薪酬的差异。像研发部门的研发工程师,同样的职位不同的工作经验也会有不同的薪酬体现。企业应该参考行业薪酬调查报告,进行合理的比对之后调整薪酬政策,进行必要的调研在符合市场条件下满足企业员工的个人需求,避免成本的浪费或者人才的流失。

 

IT互联网三大最稀缺典型的热门职位浮出

除了财务总监、业务总监、业务发展总监和人力资源总监这几个关键职位外,在IT互联网企业中,很多关系到具体业务的岗位越来越多的受到企业的重视,这些人才在市场上也有极大的竞争力,由于行业的特殊性,这些职位的薪酬幅度也较大。刘威女士称,Kelly Services的报告中显示,IT互联网行业薪酬差异化较大、市场需求大的三个典型职位分别是用户研究工程师、商业咨询顾问(BI)、算法研究员。

 

岗位之一:用户研究工程师

职位条件:

1.热衷于体验互联网产品,对用户体验有深刻的认识;2.喜欢主动思考,并对互联网产品有自己的见解;3.观察力敏锐,有较强的逻辑思维能力,有很强的口头及书面表达能力;4.良好的审美能力,了解互联网技术实现逻辑;5.心理学、工业设计、软件工程相关专业优先。

 

职责内容:

1.理解设计方案中的问题,并由此给出用户研究方案;2.发现方案设计中的问题,通过各种用户研究来论证;3.通过访谈、调研、数据挖掘等手段,发掘网站现存的问题;4.有能力刨深根源 总结各类用户问题,给设计提出建议,并协助来论证设计结果。

 

薪酬结构:

基本工资+年终奖

薪酬组成情况:

基本工资(90%)+年终奖(10%)

收入水平:

本科学历,5年工作经验/研究生学历,3年工作经验以上:18k/月~25k/月

本科学历,5年工作经验/研究生学历,3年工作经验左右:15k/月~18k/月

本科学历,5年工作经验/研究生学历,3年工作经验以下:9k/月~15k/月

职位的特点:现在互联网产品以交互体验为导向,用户研究越来越重要和受重视;

而这类职位偏向于选择心理学背景的候选人,但是心理学人才大部分流向其他工作岗位如人力资源,心理咨询等等,有互联网经验的候选人在市场上较为有限。这个职位的薪酬差异性较大,不同互联网产品都有较大差异性,例如搜索引擎和社交网站的差异化就很大,用户研究的重点也很不一样。

岗位之二:商业咨询顾问(BI)

职位条件:

要求专业能力强,有数学、统计等专业背景,有数据分析、建模和数据库工作经验,偏于前端;有数年互联网产品的运营经验,偏于后端。

职责内容:

能系统的建模,进行商业分析,对运营和销售起指导性作用。对于不同企业,以及企业发展的不同阶段、不同的部门,BI的作用往往不同。比如说在运营部门,BI用来指导运营总监的关注对象,对某个产品的投入或者删减;在广告部门,以增加广告投放的回报率;或者集团战略部门,以指导公司的并购。

 

薪酬结构:

月薪12K+年底奖金

收入水平:

30w~100w.

产品差异化调研报告范文第3篇

中图分类号:F713 文献标识码:A

内容摘要:本文采用调查问卷形式对消费者进行不同介质媒体广告态度调查研究,研究结果表明:消费者对不同媒体广告的总体态度是趋于认同的,男性消费者更加趋于理性消费,女性消费者则更加趋于感性消费;除路牌广告外,其他媒体广告都对消费者的消费行为有显著的促进作用。

关键词:消费者 媒体广告态度 消费行为 影响

引言

广告是为了某种特定的需要,通过一定形式的媒体,公开而广泛地向公众传递信息的宣传手段。从分类来看,广告有狭义广告和广义广告之分。

狭义广告指的是商业广告,是指以盈利为目的的广告,通常是商品生产者、经营者和消费者之间沟通信息的重要手段,或企业占领市场、推销产品、提供劳务的重要形式,主要目的是扩大经济效益。

企业做广告就是为了促进商品销售,扩大企业利润。而这种广告对消费者的消费行为影响如何?相关学者也做过研究:李锐、王卫红(2001)在研究大学生广告态度对大学生消费行为影响时发现,当代大学生对电视广告的态度总体上是认同的;Pollay等(1990)对中国三大城市123位消费者的调查发现,中国消费者对媒体广告的态度比西方消费者对媒体广告持有更积极的态度,并认为外国产品的媒体广告更有吸引力;Zhao等(1995)研究大多数居民对电视广告反感和对广告有抱怨;Zhou等(2002)对中国城镇居民广告态度的研究显示,多数城镇居民对广告持积极态度并喜欢广告;张红霞等(2004)通过对北京市青少年媒体广告总体态度研究发现,北京市青少年对各种媒体广告的总体态度比较消极,就是说他们不认同各种媒体广告的效果。

从学者们的研究成果来看,目前对媒体广告的态度研究比较丰富,但是目前更多研究关注的是青少年对广告的态度。现实社会中消费的主力不应该是青少年,而应是具有购买能力的成年人。本研究就针对消费者的个体出发,来研究消费者对不同媒体广告的态度,进而研究不同媒体广告态度对消费行为的影响,以便取得一些有意义的发现,为企业相关决策提供理论依据。

研究方法

(一)问卷设计

本研究的调查问卷主要是测量消费者面对不同媒体广告的态度,试图从消费者自身出发,研究其对不同媒体广告、不同诉求广告以及不同产品广告的感受行为,同时进一步测量消费者对广告的认知态度以及这些不同媒体广告对其自身消费行为的影响。

本研究的调查问卷主要是在借鉴以往学者研究的基础上,通过研究小组的讨论,形成初步调查问卷。在预调查的基础上对初始问卷进行修改,最终形成正式调查问卷。本调查问卷主要采用7级评定,问卷的计分方式采用正向计分和反向计分两种,为了更好体现问项的真实性,问卷中还设有干扰题项。

(二)数据来源

本研究所用数据来自2011年9-12月在贵州省贵阳市进行的消费者调查,由各高校的本科生、研究生及笔者本人进行数据采集,样本为贵阳市周围的306位消费者。

本次调查涉及消费者面对各种媒体广告时的各个方面,包括消费者的个人基本信息、消费者家庭状况、消费者对不同媒体广告的认知度等。样本选择时,一般考虑经常面对媒体广告的消费者。本次调查共发放问卷350份,回收315份,有效问卷306份,有效率达97.14%。样本分布消费者的各个层次,从整体上可以概括出消费者的基本情况。

研究结果

(一)消费者对不同媒体广告态度的性别差异

由于消费者自身的差异,不同的消费者对各媒体广告态度的性别差异很大。从表1中可以看出,消费者对不同媒体广告的态度是不同的,消费者对电视广告和网络广告的态度最为积极。这其中的原因可能是本次调查的消费者多数为中青年,他们了解外界的主要渠道就是通过电视和网络,这样电视和网络就成为其了解商品信息的最主要渠道。调查结果显示,消费者对各媒体广告的喜欢程度依次如下:电视广告、网络广告、杂志广告、报纸广告和路牌广告。

由于消费者性别存在差异,不同性别的消费者对不同的媒体广告的喜欢程度也是不一样的。为了进一步检验不同性别消费者对不同媒体广告的态度是否存在显著差异,本研究也分别对不同媒体广告态度的男性和女性之间进行了独立样本的T检验。从检验结果可以看出,不同的媒体广告对男性和女性消费者之间的影响不存在显著性差异,但是从平均得分来看,两者之间还是有一定的差别。男性消费者对不同媒体广告的喜好程度依次是电视广告、网络广告、杂志广告和路牌广告;女性消费者对不同媒体广告的喜好程度依次是电视广告、网络广告、路牌广告和杂志广告,说明男女消费者之间还存在一定的差别。

(二)消费者对不同诉求方式媒体广告态度的性别差异

本研究为了考察不同性别消费者对不同媒体广告的理性态度和感性态度,对消费者对感性广告和理性广告的态度进行了独立样本的T检验。

从表2来看,消费者对感性广告和理性广告存在显著性差别,这体现了现代的消费者在购买商品时是为了更好满足丰富性动机的购买心理。从结果同时可以看出,女性消费者在购买商品时更加感性,而男性消费者在购买商品时则更加理性。

产品差异化调研报告范文第4篇

本次调查共列出消费者接触产品品牌信息的四种主要渠道(表一)。

从上表看出,电视广告作为推销商品和品牌信息的主要媒介,其接触程度最高,比例达60%,而报刊占比例最低。这种状况与当前社会大众崇尚声像消费、刷文化低述的现状是密切相关的。值得注意的是,"亲友推介"占比例也较大,说明人际交往中蕴含的口传信息对消费者收集、筛选、判断家电品牌信息,形成品牌印象有重要的影响。因而它是直接或间接放大产品和企业形象的重要途径。有资料表明,这种熟识者个人之间的口传信息对消费者行为的影响力高达80%。这也是一些广告主利用广告来激发"耳语运动",衍散正面口碑信息的道理所在。

另一项研究也表明,透过大众传播的广告宣传,在引导消费者建立品牌认知印象时,早期广告中传受关系正由支配模式向平衡/互换模式转化,它更注重传播者的个体形象,多通过普通个体(而非鼓吹者)把品牌信息渗透(而非灌.输)给经过选择的受众。因此,文案人员多利用类似于个人传播的情形和手法,即有利于缩短与广告受众的心理距离。

1.性别差弃

性别作为消费者分类和分析中的基本变数,它在本研究中导致的差异表现在:男性更多依靠接触电视广告获取品牌信息(66.7%),而较少利用商场渠道和亲友间的推介。这一情形的可能解释是:男性比女性更注重利用电视来收集各种信息,女性更关心当下流行的肥皂剧之类。有趣的是,男女在报刊广告上的接触比例却相当接近。不过,这在总体上与男性重理性,女性偏感性的心理相吻合。

可见,对于收集产品信息,女性更喜欢耳闻目睹式的日常性(非专业化)的信息交流方式,如亲友互访、逛商场中的观察、咨询等,表现出与男性相异的媒介阅听策略。

2.年龄差异(表二)

在总体上,消费者对品牌信息的获知,中年人比青年人更少依靠各类广告,具体说来,一是青年层比中年层对电视、报刊广告有更高的接触频度,而对报刊广告的接触,中年男性所占比例最低,只有6.8%;二是对亲友推介渠道,在男性中青年比中年有更多的使用机会,而在女性中的情形却相反,且中年高出青年近12%;三是对商场渠道,在男性中青年运用的机会大大低于中年,相差15%,但在女性中的情形又相反。 二、家庭购买中品牌的决策形式

就"消费者"概念的外延而言,它是一个普泛的综合体。在家庭购买行为中,它一般含有五种角色地位:购买意向发起者、决策的影响者、决策者、购买行为实施者和实际使用者。本次调查对购买行为中选择品牌的决策形式考察表明,承担全部或部分决定权的决策者,可能以个体为主,也可能以集体为主(表三)。

1.决策形式和性别差异

总体上,在家电品牌决策中以家庭成员集体决策为主要形式(48.0%),反映了大家电产品购买的一般情形。这是一种经由影响者、决策者、使用者等角色共同参与的决策模式;其次是男性成员个人决策为主的形式(40.7%)。成员中"个人基本末加入决策意见"的比例不足20%。

同时,决策形式在性别上有较明显的差异:一是男性的决策地位高出女性。以个人决策为主的比例男性高出女性达16个百分点,前者"没有加入决策意见"的比例亦低于后者;二是女性更多地处在集体决策地位中,其比例高出男性12个百分点。因此,即使是在家庭集体决策中,男性成员对决策结果的影响也更大,这种内部层次的差异反映了大家电购买的理性型消费以及男性在决策中较主动的地位和较高的权威。

2.年龄差异

产品差异化调研报告范文第5篇

【关键词】 BCMA 启动子 报告基因

B淋巴细胞成熟抗原(Bcell maturation antigen, BCMA)为B细胞表面分子, 属于肿瘤坏死因子受体家族(TNFR), BCMA由184个氨基酸残基组成, 其胞内部分由80个氨基酸残基构成, BCMA的功能及作用机制迄今尚未阐明[1-3]。BCMA基因剔除小鼠有正常的脾结构, B细胞发育正常, T细胞非依赖性免疫反应和T依赖性免疫反应未见明显异常[4], 但浆细胞明显减少, 证明BCMA在维持浆细胞的存活中起了重要的作用。迄今对BCMA的研究主要集中于BCMA在B淋巴细胞发育中的作用, 及BCMA蛋白质的功能分析, 而对其自身的表达调控机制知之甚少, BCMA基因5′侧翼区基因组测序尚未完成, BCMA基因翻译起始位点前965 bp 5′侧翼区为未知序列。我们采用报告基因分析的方法, 构建了由BCMA基因5′上游不同长度片段驱动的报告载体, 通过转染不同细胞检测荧光素酶的表达, 初步探索了BCMA基因的5′上游序列启动子活性和BCMA启动子在不同细胞中活性的差异, 为进一步寻找和定位BCMA 5′上游序列内重要的顺式作用元件, 研究BCMA基因的表达调控机制提供实验依据。

1 材料和方法

1.1 材料 菌株JM109为本室保存, J558L购自上海午立生物有限公司, 293T细胞购自中科院协和医学院细胞中心, HeLa细胞为本室保存。pGL3系列报告基因载体和 pRLTK表达质粒均为Promega公司产品, pUCmT载体为上海博亚公司产品。Kpn Ⅰ、 Xho Ⅰ、 T4 DNA连接酶购自美国NEB公司, 基因组抽提试剂盒、 DNA凝胶回收试剂盒购自北京天为时代公司。DMEM培养基、 RPMI1640培养基购自Gibco公司, LipofactinamineTM2000购自美国Invitrogen公司, 双荧光报告基因检测试剂盒购自美国Promega公司, 定点突变试剂盒购自美国Stratagene公司。电转仪为美国BioRad公司产品, TD20/21化学发光检测仪为美国Promega公司产品, ND100微量紫外分光光度计为德国Nanodrop公司产品。J558L细胞采用RPMI1640培养液, 293T和HeLa细胞采用DMEM培养液。

1.2 方法

1.2.1 小鼠BCMA基因片段的扩增、 克隆及序列分析 抽提小鼠骨髓瘤细胞J558L基因组, 设计PCR引物, 上游引物含KpnⅠ酶切位点及保护碱基“GG”, 下游引物位于翻译起始位点“ATG”前, 含XhoⅠ酶切位点及保护碱基“CCG”。以J558L细胞基因组为模板, 扩增BCMA基因上游序列-820~+145片段。引物在北京三博远志公司合成, 设计如下: PB820F: 5′GGGGTTCCGAGACAGGATCTTGCTGTG3′; PB820R: 5′CCGCTCGAGGAGGGACTGGATCACTGAAA3′。 PCR反应条件: 95℃, 5 min; 94℃, 60 s, 61℃, 60 s, 72℃, 90 s, 30个循环; 72℃, 10 min。970 bp PCR产物经8 g/L凝胶电泳回收并纯化, TA克隆入pUCmT载体, 转化大肠杆菌DH5α, 挑出白色菌落, 得到TB820, 经KpnⅠ/ XhoⅠ双酶切鉴定, 并于三博远志公司测序鉴定。

1.2.2 BCMA基因报告载体的构建及鉴定 设计不同PCR上游引物, 含KpnⅠ酶切位点及保护碱基“GG”。下游引物相同, 位于翻译起始位点“ATG”前, 含XhoⅠ酶切位点及保护碱基“CCG”, 序列设计为BCMAR: 5′CCGCTCGAGGAGGGACTGGATCACTGAAA3′。分别扩增BCMA基因5′上游序列 -820~+145、 -607~+145、 -359~+145、 -157~+145、 -93~+145 5个片段。上游引物名称、 扩增片段大小、 上游引物序列 如下: (1)BCMA820(965 bp): 5′GGGGTTCCGAGACAGGATCTTGCTGTG3′; (2)BCMA607(752 bp): 5′CGGGGTACCGGATGTATACTGGATTGTCG3′; (3)BCMA359(504 bp): 5′CGGGGTACCGTCATAGTTGACAGATTCC3′; (4)BCMA157(302 bp): 5′CGGGGTACCTTGCAACTGTTACCTGGGT3′; (5)BCMA93(238 bp): 5′CGGGGTACCCAGGAATAGTTTGCTGTGA3′。

1.2.3 BCMA基因删除片段装入报告基因载体pGL3Basic 以TB820为模板, 用上述5对引物行PCR扩增。再将965、 752、 504、 302及238 bp PCR产物经8 g/L凝胶电泳回收并纯化, 溶于50 μL ddH2O中。用KpnⅠ/XhoⅠ双酶切各PCR产物 及pGL3Basic。胶回收 965、 752、 504、 302及238 bp片段及pGL3Basic 4791片段。用T4连接酶连接各PCR产物双酶切片段与pGL3Basic 4791片段, 将以上各连接产物用2×TSS一步法转化大肠杆菌JM109, 转化后得到pGL3B820、 pGL3B607、 pGL3B359、 pGL3B157、 pGL3B93。将转化菌落提取质粒后, 经KpnⅠ/ XhoⅠ双酶切鉴定, 并于三博远志公司测序鉴定。

1.2.4 报告基因载体转染细胞 三种细胞各分7 组: (1)pGL3Basic组; (2)pGL3B820组; (3)pGL3B607组; (4)pGL3B359组; (5)pGL3B157组; (6)pGL3B93 组; (7)无质粒空白对照组。各组均以pRLTK作为内参照。293T和HeLa细胞采用脂质体LipofectamineTM2000转染。J558L细胞采用电转, 电转仪电击条件: 电容950 μF, 电压260 V。放电后1~2 min取出电转杯, 冰浴10 min。

1.2.5 荧光素酶活性检测 转染24 h后, 按Promega试剂盒DualLuciferase Rporter Assay System技术手册操作。记录海肾荧光素酶检测值及荧火虫荧光素酶/海肾荧光素酶比值。

2 结果

2.1 BCMA基因片段克隆

2.1.1 PCR扩增BCMA基因5′上游序列-820~+145片段 以J558L细胞基因组为模板, 采用高保真Taq聚合酶, 扩增出大小为965 bp的小鼠BCMA基因5′上游序列-820~+145片段(图1)。

图1 BCMA基因5′上游序列-820~+145片段扩增结果(略)

Fig 1 PCR fragment of BCMA gene 5′flanking -820~+145 regions

M: DNA marker; 1: 965 bp fragment.

2.1.2 PCR产物的克隆和序列分析 PCR产物经纯化后, 装入pUCmT载体, 转化大肠杆菌DH5α, 挑取含有目的片段的克隆, KpnⅠ/XhoⅠ双酶切结果(图2, 含2.7 kb T载体片段和965 bp目的片段)。序列测定结果与GenBank(GI: AC165252)一致。

图2 pUCmBCMA的酶切鉴定(略)

Fig 2 pUCmBCMA vector digested by restriction enzyme

M: DNAmarker; 1: pUCmBCMA plasmid; 2-3: pUCmBCMA digested with Kpn Ⅰ/Xho Ⅰ.

2.2 小鼠BCMA基因报告载体的构建及鉴定

2.2.1 不同长度的小鼠BCMA基因5′上游序列片段的扩增 以J558L细胞基因组为模板, 分别扩增BCMA基因5′上游序列 -820~+145、 -607~+145、 -359~+145、 -157~+145、 -93~+145 5个片段(图3)。PCR扩增出965、 752、 504、 302及238 bp的目的片段(图4), 与设计大小相符。

图3 BCMA基因5′上游各删除序列荧光素酶报告载体构建示意图(略)

Fig 3 Sketch map for construction of series of BCMA promoter luciferase report plasmids containing 5′ flanking deletion

图4 小鼠BCMA基因5′上游序列片段的PCR扩增结果(略)

Fig 4 PCR products of mouse BCMA gene 5′ flanking fragment deletion

M: DNA marker; 1: 238 bp fragment; 2: 302 bp fragment; 3: 504 bp fragment; 4: 752 bp fragment; 5: 965 bp fragment.

2.2.2 重组质粒鉴定 (1)五个重组质粒pGL3B820、 pGL3B607、 pGL3B359、 pGL3B157、 pGL3B93均被KpnⅠ/XhoⅠ双酶切, 释放出相应小片段(图5), 表明克隆成功。(2)pGL3B820、 pGL3B607、 pGL3B359、 pGL3B157、 pGL3B93菌株经北京三博远志公司测序鉴定, 以RVprimer3为正向测序引物, 碱基序列与AC165252 BCMA 5′上游序列完全相同。

图5 重组质粒的酶切鉴定(略)

Fig 5 Identification of recombinant plasmids by restriction enzyme

M: DNA marker; 1: pGL3Basic plasmids; 2: 4 791 bp fragment digested from pGL3Basic; 3: pGL3B93 digested with KpnⅠ/XhoⅠ; 4: pGL3B157 digested with KpnⅠ/XhoⅠ; 5: pGL3B359 digested with KpnⅠ/XhoⅠ; 6: pGL3B607 digested with KpnⅠ/XhoⅠ; 7: pGL3B820 digested with KpnⅠ/XhoⅠ.

2.3 荧光素酶活性检测 5种报告基因载体在3种细胞中活性水平差异程度基本相似, 5种5′删除体的转录活性由大到小为pGL3B157>pGL3B607>pGL3B359>pGL3B93>pGL3B820(图6)。

图6 不同重组质粒在不同细胞表达的荧光素酶的活性(略)

Fig 6 Relative luciferase acting of recombinant plasmids in different cells

3 讨论

随着报告基因技术及其检测方法的不断改进, 荧光素酶、 绿色荧光蛋白以及新近克隆出的红色荧光作为无害的检测工具, 在检测活体组织和细胞基因表达、 研究疾病发病发生的分子机制、 基因治疗和药物开发等方面发挥重要作用[5, 6]。目前的报告基因有氯霉素乙酰基转移酶(chlorampheni2 col acetyltransferase, CAT)、 β半乳糖苷酶、 分泌性碱性磷酸β酶、 荧光素酶(luciferase, Luc)等[7, 8], 这些方法各有其优缺点, 可根据不同的实验条件做相应的选择。本研究构建的报告基因载体为Luc 表达载体, 在检测的敏感性上与CAT大体相当, 而且不需进行同位素标记, 操作简单敏感性好。随着不断开发出新的发光试剂, 也使其发光反应变得更加持久与稳定。

要进行BCMA启动子活性及转录调控的研究, 首先必须对上游调控序列进行克隆, 对BCMA 的5′UTR已知的900 bp进行克隆国内外未见报道。PCR克隆产物经酶切及测序鉴定, 结果与GenBank (GenBank 号AC165252) 比较, 未见1个碱基突变及缺失, 说明通过PCR 对BCMA 5′U TR 965 bp的克隆完成。为开展BCMA其他的调控研究提供了直接可利用的基因。

实验中我们首先将BCMA 的5′UTR 调控序列与报告基因联接, 构建一通过目的基因调控报告基因表达的完整的质粒载体。在转染细胞后, 通过细胞自身或外源DNA 表达的转录因子, 作用于基因调控序列。如果转录因子对目的基因调控序列存在反式调控作用, 此调控序列就会引发报告基因的表达。由于报告基因的表达量是可以检测并能进行定量分析, 因而即可反映蛋白对调控基因的作用。

对小鼠BCMA基因5′上游进行生物信息学分析, BCMA基因5′上游序列无典型的TATA和CAAT盒, 存在oct1, cdxA, cmyb等数个高度保守的潜在转录因子结合位点, 存在两个可能的转录因子Blimp1结合序列[9]。采用PCR技术, 扩增小鼠基因组DNA中BCMA基因5′上游序列 -820~+145、 -607~+145、 -359~+145、 -157~+145、 -93~+145 5个片段。构建了由上述5个片段驱动的报告基因载体pGL3B820、 pGL3B607、 pGL3B359、 pGL3B157、 pGL3B93, 瞬时转染J558L细胞、 HeLa细胞及293T细胞, 通过测定荧光素酶的表达活性, 观察BCMA基因5′上游序列片段5个删除序列在不同细胞内活性的差异, pRLTK作为内对照, 可 提供实验的归一化条件, 消除细胞数目、 细胞转染和裂解效率的差异。结果显示, 5种报告基因载体在3种细胞中活性水平差异程度基本相似, 5种5′删除体的转录激活性由大到小为pGL3B157>pGL3B607>pGL3B359>pGL3B93>pGL3B820。由于pGL3B93的启动子活性仍为无启动子的pGL3Basic的5~6倍, 提示BCMA的核心启动子可能存在于其上游序列的-93~+145区域中, 此区域集中了预测的转录因子结合位点, 说明转录因子参与了BCMA基因的表达调控。荧光素酶图形显示, 片段-(-93/+145)到(-157/+145)活性增加, 提示-157/-94 区域具有基本的正调控元件。片段(-359/+145)与(-157/+145)和(-607/+145)相比, 荧光素酶活性下降, 表明-359/-158区域存在抑制元件。 结果显示, pGL3B157在3种细胞中的转录激活能力为J558L>HeLa>293T, 且在J558L中的转录激活能力明显强于HeLa和293T细胞。J558L为具浆细胞表型的小鼠骨髓瘤细胞, HeLa为人子宫颈癌细胞, 293T细胞来源于人胚肾上皮细胞。pGL3B157在3种细胞中的转录激活能力的差异主要原因可能在于J558L细胞中具有HeLa、 293T所不具有的转录因子, 可反式调控BCMA基因的转录, 如Blimp1可上调BCMA基因的表达, 而在HeLa、 293T等细胞中无Blimp1的表达。另外BCMA启动子的表达可能具有一定的细胞类型特异性, 在B淋巴细胞类型的细胞中表达较高。但pGL3B157在无Blimp1表达的HeLa、 293T细胞中都有荧光素酶活性, 说明BCMA 5′上游核酸序列还存在其它转录因子的顺式作用元件。

本研究初步探索了BCMA基因的5′上游序列在不同细胞中转录活性的差异和BCMA 5′上游序列不同区域转录活性的差异, 分析了BCMA的核心启动子。对研究调控区中顺式作用元件与之发生相互作用的反式作用因子, 及阐明BCMA基因的表达调控机制有重要意义。

参考文献

[1] Zhang G. Tumor necrosis factor family ligandreceptor binding[J]. Curr Opin Struct Biol, 2004, 14(1): 154-160.

[2] Marsters SA, Yan M, Pitti RM. Interaction of the TNF homologues BlyS and APRIL with the TNF receptor homoplogues BCMA and TACI[J]. Curr Biol, 2000, 10(3): 785-788.

[3] Roetto A, Cicilano M, Gottardi E. A frequent polymorphism in the 5′ region of the BCMA gene[J]. Mole Cell Prob, 1997, 11(2): 311-312.

[4] Baker KP. BlySan essential survival factor for B cells: basic biology, links to pathology and therapeutic target[J]. Autoimmunity, 2004, 3(2): 368-375.

[5] Ramanelli MG, Lorenzi P , Morandi C. Identification and analysis of the human neural polypyrimidine tract binding protein gene promoter region[J]. Gene, 2005, 356(1): 11-18.

[6] Weill L, Shestakova E, Bonnefoy E. Transcription factor YY1 binds to the murine beta interferon promoter and regulates its transcriptional capacity with a dual activator/repressor role[J]. J Virol, 2003, 77(5): 2903-2914.

[7] RodriguezHenche N, Jamen F, Leroy C, et al. Transcription of the mouse PAC1 receptor gene: cellspecific expression and regulation by Zac1[J]. Biochem Biophys Acta, 2002, 1576(1): 157-162.